lipo3000全新的轉(zhuǎn)染試劑
能轉(zhuǎn)染難處理細胞的通用型試劑：
在難轉(zhuǎn)染細胞類型中具有廣泛的優(yōu)良性能
Lipofectamine? 3000試劑充分利用了我們先進的脂質(zhì)體納米顆粒技術(shù)，實現(xiàn)了超高轉(zhuǎn)染性能和可重復(fù)的試驗結(jié)果。其可在zui廣泛的難轉(zhuǎn)染和通用細胞類型（圖1）中獲得非凡的轉(zhuǎn)染效率，同時提升細胞存活率。
圖1. Lipofectamine? 3000試劑勝過了Lipofectamine? 2000和FuGENE? HD試劑。每一種試劑均用于以96孔形式轉(zhuǎn)染EK 293、HeLa、LNCaP、HepG2和A549細胞系，并在轉(zhuǎn)染后48小時分析GFP表達情況。在所有五種細胞系中，Lipofectamine? 3000都表現(xiàn)出了高于Lipofectamine? 2000和FuGENE? HD的GFP轉(zhuǎn)染效率。
 | 圖2. Lipofectamine? 3000操作手冊在保持易用性的同時，還保持了優(yōu)異的性能和可靠性，適用于廣泛的細胞系類型。 下載Lipofectamine? 3000操作手冊 > |
溫和低毒
在開發(fā)Lipofectamine? 3000時，我們對轉(zhuǎn)染過程的四個步驟進行了優(yōu)化，同時結(jié)合了我們先進的脂質(zhì)體納米顆粒技術(shù)。其所具有的超高轉(zhuǎn)染效率使得我們可以減少試劑劑量，降低處理細胞時的潛在毒性風(fēng)險。
 | 圖3. 采用劑量的每種試劑，通過綠色熒光蛋白(GFP)表達載體，以96孔形式轉(zhuǎn)染HeLa細胞。在轉(zhuǎn)染后48小時，采用流式細胞儀進行分析，以測定百分比形式的轉(zhuǎn)染效率以及GFP表達強度。相對于Lipofectamine? 2000試劑和Lipofectamine? LTX試劑，Lipofectamine? 3000試劑表現(xiàn)出了更高的轉(zhuǎn)染效率和蛋白表達水平。 |
使用生物相關(guān)性的細胞系，可為您的研究課題提供相關(guān)性的答案。Lipofectamine? 3000試劑適用于zui廣泛的細胞譜系且兼具較高的轉(zhuǎn)染效率，使您可以非常靈活地在研究中應(yīng)用自己選擇的細胞。
表1. 在不同的細胞系中，Lipofectamine? 3000試劑獲得了比Lipofectamine? 2000試劑更高的轉(zhuǎn)染效率。
| 細胞類型 | Lipofectamine? 3000試劑轉(zhuǎn)染效率 | Lipofectamine? 3000相對于 Lipofectamine? 2000試劑蛋白表達水平提高倍數(shù) |
|---|---|---|
| 3T3 |  | 4 |
| 4T1 | | 2 |
| A431 |  | 2 |
| A549 | | 3 |
| ACHN |  | 2 |
| bEnd.3 | | 9 |
| BJ | | 3 |
| BT-549 | | 4 |
| C2C12 | | 3 |
| C6 | | 5 |
| Caco-2 | | 2 |
| Caki-1 | | 4 |
| CHO-K1 | | 1 |
| CHO-S | | 1 |
| COLO 205 | | 4 |
| COS-7 | | 4 |
轉(zhuǎn)染效率 (%): <30% 30-50% 51-79% >80% 
Lipofectamine? 3000試劑與的Lipofectamine? 2000試劑相比，在多種組織來源的癌癥細胞中具有更高的轉(zhuǎn)染效率。在所選的癌癥細胞系中，使用Lipofectamine? 2000僅有25%被認為易于轉(zhuǎn)染（>50%的轉(zhuǎn)染效率），而使用Lipofectamine? 3000卻有60%的細胞系是易于轉(zhuǎn)染的。
 | 圖4. 采用Lipofectamine? 2000試劑和Lipofectamine? 3000試劑將表達GFP的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至17種癌癥細胞系中，利用各試劑推薦的實驗方案，在24孔板中進行轉(zhuǎn)染，每孔質(zhì)粒用量為0.5μg。轉(zhuǎn)染48小時后分析GFP表達情況。重復(fù)檢測3次，數(shù)據(jù)點顯示平均轉(zhuǎn)染效率 + 標(biāo)準(zhǔn)差。 |
Lipofectamine? 3000優(yōu)異的轉(zhuǎn)染效率配合Epi5? Episomal iPSC Reprogramming Kit保證了體細胞的重編程，無需電轉(zhuǎn)。
圖5. 結(jié)果來自于明場顯微鏡，(A) Lipofectamine? 3000和 (B) Neon? 轉(zhuǎn)染系統(tǒng)都表明在生成iPSC細胞群落時重編程成功了。使用堿性磷酸酶進行末端染色。
改善基因組編輯結(jié)果
開發(fā)Lipofectamine? 3000試劑，旨在突破輸送技術(shù)的界限，促進生物相關(guān)系統(tǒng)內(nèi)的新技術(shù)發(fā)展，例如基因組編輯。通過這一新試劑，GeneArt? TALs 和 CRISPR 可以靶向HepG2和U2OS細胞內(nèi)的AAVS1位點，同時表現(xiàn)出更佳的轉(zhuǎn)染效率、平均熒光強度和基因組切割效果。這些改進之處有助于zui大限度減少繁重的下游工作，更便于進行干細胞處理，增強轉(zhuǎn)基因在細胞基因組中的位點特異性插入。
下載應(yīng)用說明 >
圖6. GeneArt? TALs 和 CRISPRs的切割效率。TAL和CRISPR靶向(A) U2OS和(B) HepG2細胞系中的AAVS1位點。采用GeneArt?基因組切割檢測試劑盒分析切割效率。
圖7. 使用CRISPR載體時的轉(zhuǎn)染效率和蛋白表達。該載體含有OFP報告基因，并采用Lipofectamine? 2000或Lipofectamine? 3000轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染到(A) U2OS和(B) HepG2細胞系中。柱狀圖所示為報告基因的表達。圖片所示為相應(yīng)細胞表達OFP的熒光圖。
轉(zhuǎn)染干細胞
圖8. 使用Lipofectamine ? 3000轉(zhuǎn)染H9干細胞 (A)或iPSC (B)。
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